ДНК- и РНК-олигонуклеотиды

Синтез немодифицированных олигонуклеотидов осуществляется на автоматическом синтезаторе амидофосфитным методом.
Технология синтеза позволяет получать любые количества олигонуклеотидов.

По завершении синтеза олигонуклеотид снимается с полимерного носителя, с него удаляются защитные группы (стадия деблокирования), и далее он подвергается очистке с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ или электрофореза в полиакриламидном геле.

Олигонуклеотиды отвечают всем требованиям качества и точно соответствуют паспортным данным (смотрите паспорт на олигонуклеотиды).

Наши олигонуклеотиды готовы к использованию

• Все олигонуклеотиды полностью деблокированы, очищены с помощью гель-электрофореза или ВЭЖХ, обессолены, а также проведены их количественные измерения.
• Олигонуклеотиды обычно растворены в деионизированной воде (milliQ H2O) или могут быть предоставлены Вам в лиофилизованном виде (по требованию).
• К олигонуклеотидам прилагается "Паспорт на синтетические олигонуклеотиды", в котором указана вся необходимая информация: последовательность, длина, концентрация, количество, молекулярный вес.

Контроль качества олигонуклеотидов

• Систематический визуальный контроль (прозрачный раствор, отсутствие видимого осадка).
• Спектрофотометрический анализ и вычисление концентрации
• Контроль чистоты олигонуклеотида с помощью гель-электрофореза с использованием маркеров длин.
• Контроль качества для модифицированных олигонуклеотидов. Для доказательства присутствия и функциональности метки используются следующие подходы:
  • флуоресцентные метки: присутствие метки в олигонуклеотиде целевой длины контролируется с помощью гель-электрофореза с последующей визуализацией продукта под УФ-лампой;
  • биотин: присутствие биотина в олигонуклеотиде целевой длины контролируется с использованием как электрофоретического, так и колориметрического анализа;
  • амино-группа: присутствие амино-группы в олигонуклеотиде целевой длины доказывается с помощью ее последующей реакции с биотином;
  • фосфатная группа: присутствие фосфатной группы в олигонуклеотиде целевой длины доказывается с использованием гидролиза аликвоты модифицированного олигонуклеотида щелочной фосфатазой с последующим электрофоретическим анализом продуктов реакции.
• Аналитический анализ олигонуклеотидов с использованием обращенно-фазовой или ион-парной ВЭЖХ с предоставлением профиля разделения (по требованию).

Рекомендации по хранению

• Олигонуклеотиды стабильны в водном растворе при температуре 25°С в течение 1-2 недель при концентрации выше 150 нг/мкл (20 мкМ). При более длительном использовании или более низкой концентрации олигонуклеотиды следует хранить замороженными при −20°С.
• Избегайте частого размораживания/замораживания олигонуклеотидов, если их концентрация ниже 100 нг/мкл (15 мкМ).
• В случае наличия флуоресцентной метки олигонуклеотиды следует хранить в темноте.
• Избегайте контакта олигонуклеотидов с нестерильными предметами, особенно при работе с ферментами и агрессивными средами.
• При соблюдении указанных условий хранения компания СИНТОЛ гарантирует качество олигонуклеотидов в течение не менее 12 месяцев.

ПОМНИТЕ! Разбавление и замораживание олигонуклеотидов при концентрации ниже 15 мкМ может повлиять на качество олигонуклеотида при хранении.