Выявление ДНК соевой цистообразующей нематоды с помощью набора реагентов «Heterodera glycines-РВ»

Набор реагентов «Heterodera glycines-РВ»

Heterodera glycines Ichinohe, 1952- cоевая цистообразующая нематода, впервые описанная в Японии. Наиболее значимые растения-хозяева - соя (Glycine max), а также многие виды семейства бобовые (Fabaceae). H. glycinesвключена в Единый перечень карантинных объектов Евразийского экономического союза, широко распространена в странах, где выращивают сою, включая Японию, Китай, США, Южную Америку и другие.

Симптоматика поражения соевой цистообразующей нематодой характеризуется выраженными морфологическими изменениями. К ним относятся: значительное отставание в росте и развитии, появление на корневой системе дополнительных корешков сопровождающееся уменьшением числа клубеньков, а также появление хлорозов, которые становится заметными уже через два месяца после начала вегетации. По мере развития болезни происходит преждевременное опадение листьев и уменьшение количества цветов. Это в конечном итоге приводит к ухудшению посевных качеств семян, таких как всхожесть, жизнеспособность, размер и масса, что отрицательно влияет на экономическую ценность урожая. Наиболее эффективной мерой борьбы с H. glycines является севооборот с исключением растений-хозяев на 4-5 лет.

«Heterodera glycines-РВ»

Набор реагентов для выявления ДНК cоевой цистообразующей нематоды методом полимеразной цепной реакции в реальном времени

Набор может быть использован в лабораторных центрах и институтах, проводящих контроль фитосанитарного состояния растений, в том числе посадочного материала в целях обнаружения Heterodera glycines. Набор позволяет качественно определить, содержится ли в образце ДНК Heterodera glycines.

Набор реагентов «Heterodera glycines-РВ» позволяет одновременно выявлять в одной реакционной смеси специфичный фрагмент ДНК Heterodera glycines – по каналу флуоресценции FAM/Green, а также внутренний положительный контроль (ВПК) – по каналу флуоресценции HEX/Yellow. Реакция ВПК необходима для исключения ложноотрицательных результатов.

• Чувствительность
  Чувствительность ПЦР при использовании набора реагентов «Heterodera glycines-РВ» не менее 1,0*10³ копий ДНК в миллилитре пробы.
• Специфичность
  Специфичность – ложноотрицательные результаты при анализе образцов, содержащих ДНК целевого объекта, отсутствовали, ложноположительные результаты при анализе образцов ДНК, не содержащих вышеперечисленные специфические фрагменты, отсутствовали.

Набор реагентов апробирован на следующих приборах: Gentier 96Е (Tianlong, Китай), QuantStudio 5 (Thermo Fisher Scientific, США), «CFX96» («BioRad», США), «DT» («ДНК-технология», Россия), «Rotor Gene» (Qiagen), «АНК-32 (32М, 48)» (ИАП РАН, г. Санкт-Петербург, Россия)