Определение количества ТА-повторов в промоторной области гена UGT1A1 с помощью набора реагентов «Синдром Жильбера (Gilbert Syndrome)»

Набор «Синдром Жильбера (Gilbert Syndrome)» позволяет определить количество ТА-повторов в промоторной области гена UGT1A1 методом капиллярного электрофореза.

Синдром Жильбера – аутосомно-рецессивное наследственное нарушение глюкуронизации билирубина, характеризующееся неконъюгированной гипербилирубинемией. Синдром чаще всего диагностируют после подтверждения отсутствия повреждения печени или явного гемолиза. Синдром Жильбера встречается примерно у 3-10% населения. Однако полногеномные исследования показывают, что этот показатель может быть выше, поскольку синдром иногда характеризуется бессимптомным течением, а проявляется эпизодами желтухи при провоцирующих факторах: на фоне голодания, инфекционных заболеваний, эмоциональной и физической нагрузки и т.д.

Синдром Жильбера обусловлен генетическими вариантами в гене UGT1A1, расположенном на длинном плече хромосомы 2 (2q37), который кодирует фермент уридиндифосфат-глюкуронозилтрансферазу-1A1 (UGT1A1), необходимый для конъюгации и последующей экскреции билирубина. Наиболее частым вариантом является увеличение количества ТА-повторов в промоторной области гена с 6 до 7 (реже до 8-ми). Увеличение количества ТА-повторов в промоторе гена приводит к уменьшению его экспрессии и, как следствие, снижению эффективности процесса конъюгации и выведения билирубина.

Помимо аллелей с 6-ю ТА повторами (UGT1A1*1) и с 7-ю ТА повторами (UGT1A1*28) в промоторной области гена набор позволяет выявлять редкие аллельные варианты: UGT1A1*36 с 5-ю ТА повторами (фенотипически проявляется повышением функциональной активности фермента, обусловленной его повышенной экспрессией), а также UGT1A1*37 с 8-ю ТА повторами, для которого значительно снижена экспрессия UGT1A1 и, как следствие, понижена эффективность конъюгации и экскреции билирубина.

Особенностью набора является проведение одноэтапной ПЦР, совмещающей стадию выделения ДНК с этапом амплификации в одной пробирке (внесение цельной крови непосредственно в реакционную смесь). Набор адаптирован под генетические анализаторы Нанофор-05 и ABI 3130/3500.

В наборе используются флуоресцентно меченые олигонуклеотиды, детекция осуществляется по каналу FAM. Стандарт длин СД-240, входящий в набор, флуоресцентно мечен красителем серии Sy660.