Выберите функцию
Начните с того, какую роль должна выполнять модификация в эксперименте.
Функциональная конструкция
Метки, гасители, линкеры и другие группы задают функциональность олигонуклеотида. Перед выбором проверьте назначение, позицию и совместимость.
Начните с того, какую роль должна выполнять модификация в эксперименте.
Не каждая группа доступна одновременно на 5′-, 3′- и внутренней позиции.
Цена зависит от выбранной модификации и фасовки продукта.
Функциональные группы
Позиция, способ введения, очистка и обозначение в sequence так же важны, как название группы. Каталог ниже показывает реальные символы и допустимые положения.
Часто используется для меток, фосфатов, линкеров и защитных групп.
Может задавать метку, гаситель, блокирование удлинения или связь с носителем.
Обычно требует специального модифицированного основания или линкера.
Для очищенных флуоресцентно-меченых конструкций заявляется чистота не менее 95%.
Основные классы
Разные классы модификаций меняют оптические, химические или биологические свойства олигонуклеотида.
Используются для детекции. Могут располагаться на 5′-, 3′-конце или внутри цепи при наличии подходящей химии.
Поглощают энергию флуорофора и используются в зондах; рабочий диапазон должен перекрывать эмиссию красителя.
Обеспечивает высокоаффинное связывание с авидином и стрептавидином для иммобилизации и детекции.
Создают реакционноспособную группу для постсинтетической конъюгации; доступны на концах и во внутренней позиции.
Задают расстояние между участками, заменяют неопределённый фрагмент или отделяют метку от последовательности.
Повышают устойчивость к нуклеазам и применяются в антисенсовых и других задачах, требующих защиты цепи.
Флуоресцентные метки
Краситель может вводиться непосредственно при синтезе, через модифицированную подложку CPG или постсинтетически через аминолинкер.
Позволяет встроить метку по протоколу твёрдофазного синтеза в допустимую позицию.
Используется для некоторых 3′-концевых красителей.
Активированное производное красителя реагирует с аминолинкером; такой маршрут требует дополнительной очистки.
Часто требует модифицированного dT-линкера и отдельного символьного кода.
Очистка и контроль
Для флуоресцентных конструкций применяется многостадийное разделение, затем подтверждаются оптические свойства и полноразмерность.
Гель-фильтрация удаляет свободный краситель и соли.
ВЭЖХ или ПААГ отделяют меченый олигонуклеотид от непрореагировавшей цепи.
Спектр помогает подтвердить вклад красителя и нуклеотидной части.
Для ряда флуоресцеин-меченых продуктов используется дополнительный контроль разделения.
Практические вопросы
Публичное название описывает химическую группу, а технический symbol кодирует конкретную позицию и способ записи в последовательности.
Нет. Допустимые 5′-, 3′- и внутренние положения зависят от конкретной химии и отражены в справочнике.
Они требуют модифицированного основания или линкера и могут добавлять отдельные стадии синтеза и очистки.
Выберите группу, найдите модификацию по символу или названию и сравните ориентировочную стоимость для доступных фасовок.
Модификация важна не только сама по себе, но и тем, где она может стоять в последовательности. Перед заказом проверьте расположение, спектральные параметры и совместимость с очисткой.
Чаще используется для флуорофоров, биотина, фосфатных и других терминальных меток.
Обычно подходит для гасителей, блокирующих групп и терминальных модификаций зонда.
Подходит для dT/dC-модификаций и конструкций, где метка должна быть внутри цепи.
Для зондов сравнивайте λem красителя с диапазоном гашения, а не только названия.
применение: зонды
| № | Симв. код | Название | Расположение | Экстинкция | Молек. масса | Цена ? |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Флуорофоры | ||||||
| 1 |
5ROX-HPROX флуорофор |
5-карбокси-X-родамин-гидроксипипиридин— Пример 5′: 5ROX-HP/ACGTACGT |
5′ | 21 | 697 |
от 98 ₽
|
| 2 |
5TAMRA-ProTAMRA флуорофор |
5-карбокситетраметилродамин -пролинол— Пример 5′: 5TAMRA-Pro/ACGTACGT |
5′ | 32 | 592 |
от 196 ₽
|
| 3 |
6ROX-HPROX флуорофор |
6-карбоски- X-родамин-гидроксипипиридин— Пример 5′: 6ROX-HP/ACGTACGT |
5′ | 21 | 697 |
от 98 ₽
|
| 4 |
6Sy630-HPSy630 флуорофор |
6-карбокси-родамин-630-гидроксипипиридин— Пример 5′: 6Sy630-HP/ACGTACGT |
5′ | 21 | 737 |
от 98 ₽
|
| 5 |
6TAMRA-HPTAMRA флуорофор |
6-тетраметил-аминокарбоксиродамин-гидроскипиперидин— Пример 5′: 6TAMRA-HP/ACGTACGT |
5′ | 32 | 594 |
от 98 ₽
|
| 6 |
Cy3Cy3 флуорофор |
Индокарбоцианин— Пример 5′: Cy3/ACGTACGT |
5′/3′ | 4 | 841 |
от 196 ₽
|
| 7 |
Cy3 sulfoCy3 флуорофор |
Cy3 sulfo— Пример 5′: Cy3 sulfo/ACGTACGT |
5′ | — | 1 038 |
от 196 ₽
|
| 8 |
Cy3.5Cy3.5 флуорофор |
Дибензоиндо-карбоцианин— Пример 5′: Cy3.5/ACGTACGT |
5′/3′ | 24 | 868 |
от 196 ₽
|
| 9 |
Cy5Cy5 флуорофор |
Индодикарбоцианин— Пример 5′: Cy5/ACGTACGT |
5′/3′ | 10 | 870 |
от 98 ₽
|
| 10 |
Cy5.5Cy5.5 флуорофор |
Дибензоиндо-дикарбоцианин— Пример 5′: Cy5.5/ACGTACGT |
5′/3′ | 21 | 967 |
от 98 ₽
|
| 11 |
Cy7.5Cy7.5 флуорофор |
Cy7.5— Пример 5′: Cy7.5/ACGTACGT |
5′/3′ | — | 964 |
от 196 ₽
|
| 12 |
dT-6FAM-C8N3FAM флуорофор |
Внутренний 6FAM через клик-химию на длинном линкере— Пример внутри: AC(dT-6FAM-C8N3)GTAC |
T | 30 | 971 |
от 481 ₽
|
| 13 |
FAMFAM флуорофор |
Карбоксифлуоресцеин— Пример 5′: FAM/ACGTACGT |
5′/3′ | 21 | 537 |
от 98 ₽
|
| 14 |
HEXHEX флуорофор |
6-карбокси-гексахлор-флуоресцеин— Пример 5′: HEX/ACGTACGT |
5′ | 31 | 908 |
от 330 ₽
|
| 15 |
JOEJOE флуорофор |
6-карбокси-4',5'-дихлор-2',7'-диметокси-флуоресцеин— Пример 5′: JOE/ACGTACGT |
5′ | 12 | 668 |
от 330 ₽
|
| 16 |
LC Red 610 флуорофор |
LC Red 610— Пример 5′: LC Red 610/ACGTACGT |
5′ | — | 824 |
от 240 ₽
|
| 17 |
LC Red 640 флуорофор |
LC Red 640— Пример 5′: LC Red 640/ACGTACGT |
5′ | — | 913 |
от 240 ₽
|
| 18 |
R6GR6G флуорофор |
Карбоксиродамин-6G— Пример 5′: R6G/ACGTACGT |
5′/3′ | 21 | 622 |
от 98 ₽
|
| 19 |
ROXROX флуорофор |
Карбокси-Х-родамин— Пример 5′: ROX/ACGTACGT |
5′/3′ | 21 | 922 |
от 98 ₽
|
| 20 |
Sy698-C3-N3Sy698 флуорофор |
краситель Sy698— Пример 5′: Sy698-C3-N3/ACGTACGT |
5′/3′ | — | 843 |
от 196 ₽
|
| 21 |
T-Cy5Cy5 флуорофор |
Cy5 (внут. T)— Пример внутри: AC(T-Cy5)GTAC |
T | 19 | 987 |
от 240 ₽
|
| 22 |
T-FAMFAM флуорофор |
6-карбокси-флуоресцеин (внутр. T)— Пример внутри: AC(T-FAM)GTAC |
T | 38 | 815 |
от 196 ₽
|
| 23 |
T-R6GR6G флуорофор |
Карбоксиродамин- 6G (внут. T)— Пример внутри: AC(T-R6G)GTAC |
T | — | 896 |
от 240 ₽
|
| 24 |
T-ROXROX флуорофор |
6-карбокси-Х-родамин (внутр. T)— Пример внутри: AC(T-ROX)GTAC |
T | — | — |
от 196 ₽
|
| 25 |
T-TAMRATAMRA флуорофор |
6-карбокситетраметил-родамин (внутр Т)— Пример внутри: AC(T-TAMRA)GTAC |
T | 32 | 869 |
от 240 ₽
|
| 26 |
T-Сy3Сy3 флуорофор |
Cy3 (внут. T)— Пример внутри: AC(T-Сy3)GTAC |
T | 14 | 1 045 |
от 240 ₽
|
| 27 |
T-Сy5Сy5 флуорофор |
Су5 (внут. Т)— Пример внутри: AC(T-Сy5)GTAC |
T | 19 | 987 |
от 240 ₽
|
| 28 |
TAMRATAMRA флуорофор |
Карбокситетраметил-родамин— Пример 5′: TAMRA/ACGTACGT |
5′/3′ | 32 | 746 |
от 98 ₽
|
| 29 |
TETTET флуорофор |
6-карбокси-тетрахлор-флуоресцеин— Пример 5′: TET/ACGTACGT |
5′ | 16 | 838 |
от 330 ₽
|
| Гасители флуоресценции | ||||||
| 30 |
5'-RTQ1RTQ1 гаситель |
амедит RTQ1 на 5'-конец— Пример 5′: 5'-RTQ1/ACGTACGT |
5′ | 8 | 658 |
—
|
| 31 |
BHQ1BHQ1 гаситель |
Black Hole Quencher-1<p>With the growing popularity of red and near-infrared dyes, we are offering the Black Hole QuencherTM dyes (BHQs). BHQ dyes are robust dark quenchers that very nicely complement our existing product line. They ar… Пример 5′: BHQ1/ACGTACGT |
5′/3′ | 8 | 569 |
от 98 ₽
|
| 32 |
BHQ2BHQ2 гаситель |
Black Hole Quencher-2— Пример 5′: BHQ2/ACGTACGT |
5′/3′ | 8 | 571 |
от 98 ₽
|
| 33 |
BHQ3BHQ3 гаситель |
Black Hole Quencher-3— Пример 5′: BHQ3/ACGTACGT |
5′/3′ | 13 | 612 |
от 98 ₽
|
| 34 |
MGBMGB гаситель |
minor groove binding— Пример 3′: ACGTACGT/MGB |
3′ | — | 831 |
от 1 145 ₽
|
| 35 |
RTQ1RTQ1 гаситель |
Real Time Quencher-1— Пример 5′: RTQ1/ACGTACGT |
5′/3′ | 8 | 660 |
от 98 ₽
|
| 36 |
T-BHQ1BHQ1 гаситель |
Black Hole Quencher-1 - внутр. dT<p><a class="float-start me-3" data-fancybox="filemanager" href="https://t.syntol-npk.ru/image/catalog/oligonucleotides/modifications/BHQ-2-dT.png"><img alt="" class… Пример внутри: AC(T-BHQ1)GTAC |
T | 30 | 955 |
от 240 ₽
|
| 37 |
T-BHQ2BHQ2 гаситель |
Black Hole Quencher-2 - внутр. dT— Пример внутри: AC(T-BHQ2)GTAC |
T | 26 | 957 |
от 240 ₽
|
| Без группы | ||||||
| 38 |
SH гаситель |
Тио— Пример 3′: ACGTACGT/SH |
3′ | — | 322 |
от 51 ₽
|
Следующий шаг
Используйте каталог как справочник, а окончательную конструкцию задайте в редакторе.
Каталог, лабораторные расчёты, олиго и помощь по НАНОФОР 05 в одном диалоге.
Опишите лабораторную задачу обычными словами. Я подключу подходящий проверенный инструмент СИНТОЛ.
Критические процедуры остаются привязаны к утверждённым данным и справочникам.